双组分TMB显色试剂盒

Cat No : PK10004



产品介绍

辣根过氧化物酶(HRP)及其偶联物是免疫分析技术中常用的一种酶,由于3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)在HRP 的显色反应体系中,比其它色原物具有更高的灵敏度且无致癌性而被广泛应用。Proteintech 研制的双组分TMB 显色液具有背景低,灵敏度高,生成的产物在一定时间内稳定,吸光度值不改变的特点,很适合做为HRP 反应体系的显色底物。主要应用于酶联免疫吸附实验(ELISA),免疫斑点杂交或者免疫组化等的检测分析。

本产品所含显色液A 为淡黄色透明液体,显色液B 为无色透明液体,均无沉淀、颗粒及絮状物。使用时与HRP 溶液反应生成蓝色产物,加入酸性终止液(2M H2SO4)终止后反应液由蓝色变为黄色,生成产物无絮状物,放置较长时间颜色仍保持稳定。

 组分50.5 mL101 mL
 TMB显色液A0.5 mL1 mL 
 TMB显色液B50 mL100 mL


保存条件

2-8℃避光保存,有效期1 年

使用方法

1. 工作液配制:按A:B=1:100 比例,取出适量A 和B 液在洁净的容器中混合即为工作液。工作液应现用现配,一经混合,请立即使用。

2. 加液: 显色时, 将酶标板内HRP 结合物用洗涤液清洗3-5 次, 每孔加底物显色工作液100 μL,在室温(15-25℃)或37℃下避光温育15-30 分钟,直至显色至预期深浅。

3. 终止:每孔加入与显色工作液等体积(100 μL)的酸性终止液(2M H2SO4)终止反应,孔中反应液由蓝色变为黄色。

4. 读数:终止反应后15 分钟内,酶标仪450nm 读取各孔溶液的光吸收值

注意

1. 如果出现高的反应背景或沉淀,表明TMB 底物反应过于强烈。为了避免产生沉淀,可在终止后马上读数;或者进一步稀释一抗或HRP 结合二抗。

2. 使用时避免交叉污染。

3. 禁止TMB 溶液接触任何金属材料。

4. TMB 溶液孵育至室温后再使用。

5. TMB 对人体有刺激性,请穿实验服并戴一次性手套操作,做好防护。

6. 终止液(2M H2SO4)呈酸性,具有腐蚀性,严禁接触皮肤、眼睛、粘膜等。如果眼睛或皮肤接触了终止液,应立即用大量水冲洗。

Publications

ApplicationTitle

Fish Shellfish Immunol

Apostichopus japonicus matrix metalloproteinase-16 might act as a pattern recognition receptor.

Authors - Jingwei Jiang
ELISA

Vaccines (Basel)

Cell Culture-Derived Tilapia Lake Virus-Inactivated Vaccine Containing Montanide Adjuvant Provides High Protection against Viral Challenge for Tilapia.

Authors - Weiwei Zeng