同型对照

正常情况下,抗体会与特定的蛋白质或抗原结合;但有时抗体也会以非特异性的方式与其他蛋白质或细胞组分结合。设置实验对照是判断实验中使用的
抗体是否存在非特异性结合的关键。

抗体脱靶或非特异性结合会导致假阳性结果,从而难以判断是非特异性的背景染色还是特异性的抗原着色。因此,设置适当的实验对照来确保结果的
可靠性至关重要。

同型对照是抗体染色应用中用作阴性对照的抗体。

同型对照采用与靶标一抗相同种属来源、相同亚型的免疫球蛋白,但对目标蛋白无特异性。

isotype control conjugated primary antibody

为什么要使用同型对照?

同型对照可以帮助区分实验中的抗体特异性着色和非特异性背景染色。抗体(有时还有偶联荧光标签或生物素标签的抗体)可以非特异性地与其他蛋白质、内源性酶、脂质和Fc受体结合。将同型对照作为阴性对照也可以确定方案中的封闭和/或清洗步骤是否充分。

同型对照应与一抗的一些特征相匹配:

  • 同一种属

  • 同一免疫球蛋白类型

  • 同一免疫球蛋白亚类(对于某些种属)

  • 与一抗相同的标签(生物素、HRP、荧光团等)

例如,如果您使用的一抗是与FITC结合的小鼠IgG2b抗体,那么您需要选择的也是与FITC结合的小鼠IgG2b同型对照抗体。

如果使用未结合的一抗和二级抗体进行检测,则同型对照应与一级抗体匹配,以确定是否存在一抗的非特异性染色。仅二抗(样本仅用二抗染色,未使用一抗)也可作为对照,以确定二抗的背景染色。

isotype control conjugated primary antibody

同型对照最常用于FC、IP和IHC,但也可用于WB、ELISA和IF/ICC等其他应用中的封闭和包被。

同型对照实验方案

同型对照抗体只是替代对照样品的一抗,方案的其余部分完全相同(减少实验变量带来的变化)。

应在与实验样品完全相同的条件下处理同型对照,包括使用的浓度,需要与一抗相同。

如果使用二抗,应使用相同的二抗对同型对照进行染色。

1x10^6 human PBMCs were surface stained with 0.2 ug Rabbit IgG Isotype Control Recombinant Antibody (98136-1-RR, Clone: 240953C9) and PE-Conjugated Goat Anti-Rabbit IgG(H+L) (red in histogram), or 0.2 ug Anti-Human CD4 Rabbit Recombinant Antibody (98042-1-RR) and PE-Conjugated Goat Anti-Rabbit IgG(H+L) (green in histogram), or unstained (blue in histogram). Cells were not fixed.
Proteintech同型对照产品
  • 100余种同型对照抗体
  • CoraLite® Plus 405,CoraLite® Plus 488,CoraLite® Plus 555,CoraLite® Plus 647,CoraLite® Plus 750,APC,FITC,PE,PerCP-Cyanine5.5 等19种染料
  • 可用物种:兔、小鼠、大鼠、亚美尼亚仓鼠
常规同型对照抗体
名称 货号 应用
Mouse IgG1 isotype control 66360-1-Ig WB ,ELISA
Mouse IgG2a isotype control 66360-2-Ig WB ,ELISA
Mouse IgG2b isotype control 66360-3-Ig WB, IHC, ELISA
Mouse IgG3 isotype control 66360-4-Ig WB ,ELISA
Rabbit IgG Isotype Control Recombinant Antibody 98136-1-RR New WB, IHC, IF/ICC, FC, FC (Intra), IP
Mouse IgG B900620 WB, IP, ChIP, ELISA
Goat IgG B900630 WB
可提供丰富的荧光染料偶联的同型对照抗体
流式同型对照抗体列表 (点击下表货号查看)
类型 同型对照抗体名称 克隆号 裸抗货号
Rabbit IgG FcZero-rAb™ Rabbit IgG Isotype Control Recombinant Antibody 240953C9 FcA98136
Rabbit IgG Isotype Control Recombinant Antibody 240953C9 98136-1-RR
Mouse IgG1 Mouse IgG1 Isotype Control Monoclonal Antibody MOPC-21 65124-1-Ig
Mouse IgG2a Mouse IgG2a Isotype Control Monoclonal Antibody MOPC-173 65244-1-Ig
Mouse IgG2a Isotype Control (MOPC-173) Recombinant Antibody MOPC-173 65571-1-MR
Mouse IgG2a Isotype Control Monoclonal Antibody C1.18.4 65208-1-Ig
Mouse IgG2b Mouse IgG2b Isotype Control Monoclonal Antibody MPC-11 65128-1-Ig
Mouse IgM, λ Mouse IgM Isotype Control Monoclonal Antibody MOPC-104E 65243-1-Ig
Rat IgG1 Rat IgG1 Isotype Control Monoclonal Antibody HRPN 65212-1-Ig
Rat IgG2a Rat IgG2a Isotype Control Monoclonal Antibody 2A3 65209-1-Ig
Rat IgG2a Isotype Control Recombinant Antibody 250862A1 98427-1-TR
Rat IgG2b Rat IgG2b Isotype Control Monoclonal Antibody LTF-2 65211-1-Ig
Armenian Hamster Armenian Hamster IgG Isotype Control Monoclonal Antibody PIP 65210-1-Ig

其他对照抗体

类型 产品名称 货号
对照血清 Rabbit anti-Goat IgG serum B900710
Goat anti-Human IgG serum B900720
Rabbit Serum B900760
Goat serum B900780