同型对照

同型对照是抗体染色应用中用作阴性对照的抗体。

同型对照采用与靶标一抗相同种属来源、相同亚型的免疫球蛋白，但对目标蛋白无特异性。

同型对照可以帮助区分实验中的抗体特异性着色和非特异性背景染色。抗体（有时还有偶联荧光标签或生物素标签的抗体）可以非特异性地与其他蛋白质、内源性酶、脂质和Fc受体结合。将同型对照作为阴性对照也可以确定方案中的封闭和/或清洗步骤是否充分。

同型对照应与一抗的一些特征相匹配:

例如，如果您使用的一抗是与FITC结合的小鼠IgG2b抗体，那么您需要选择的也是与FITC结合的小鼠IgG2b同型对照抗体。

如果使用未结合的一抗和二级抗体进行检测，则同型对照应与一级抗体匹配，以确定是否存在一抗的非特异性染色。仅二抗（样本仅用二抗染色，未使用一抗）也可作为对照，以确定二抗的背景染色。

同型对照最常用于FC、IP和IHC，但也可用于WB、ELISA和IF/ICC等其他应用中的封闭和包被。

同型对照实验方案

同型对照抗体只是替代对照样品的一抗，方案的其余部分完全相同（减少实验变量带来的变化）。

应在与实验样品完全相同的条件下处理同型对照，包括使用的浓度，需要与一抗相同。

如果使用二抗，应使用相同的二抗对同型对照进行染色。

1x10^6 human PBMCs were surface stained with 0.2 ug Rabbit IgG Isotype Control Recombinant Antibody (98136-1-RR, Clone: 240953C9) and PE-Conjugated Goat Anti-Rabbit IgG(H+L) (red in histogram), or 0.2 ug Anti-Human CD4 Rabbit Recombinant Antibody (98042-1-RR) and PE-Conjugated Goat Anti-Rabbit IgG(H+L) (green in histogram), or unstained (blue in histogram). Cells were not fixed.