HRP标记抗体/蛋白试剂盒

Cat No : PK20001



产品介绍

 组分200U
 500U1000U5000U
 辣根过氧化酶 (Activated HRP)1 管(瓶) 冻干粉
 反应启动液 (Modifier Reagent)1 管
 反应终止液 (Quencher Reagent)1 管
 产物保护液 (Protection Reagent)1 瓶


保存条件

该试剂盒在低温下运输,收到后请置于-20°C 保存,保存时间 1 年。

使用方法

1. 从-20°C 中取出 HRP 标记试剂盒,室温条件下平衡 30 分钟,使反应启动液和反应终止液充分解冻后混匀。 

2. 向每 10 μl 待标记的抗体或其它蛋白分子溶液中加入 1 μl 反应启动液,用移液枪反复吹打几次以充分混匀,避免产生气泡。 

3. 打开辣根过氧化酶管(瓶)盖,将上述已启动的抗体或其它蛋白溶液直接加到该管(瓶)中,用移液枪反复吹打几次以充分混匀,避免 产生气泡,室温放置 3 小时。 

4. 向辣根过氧化酶反应管(瓶)中加入反应终止液,比例为每 10 μl 抗体或其它蛋白溶液加入 1 μl 反应终止液,充分混匀,室温放置 1 小 时。 

5. 终止完成后,加入等体积的产物保护液,充分混匀,置于-20°C 保存。(当待标记抗体或其它蛋白溶液中已含有 50%甘油时,不需此步)

注意

1. 待标记的抗体,其效价应该在 1:20 以上。

2. 抗体缓冲液:以 0.01M pH7.4 PBS 为佳,最好不含有甘油、叠氮钠、氨基物质(包括甘氨酸、Tris 等)。但是,少量的氨基物质(<0.05M)和少量的叠氮钠(<0.02%)对标记结果不会产生严重影响。如果待标记抗体含有高于以上浓度的物质,需用 0.01M pH 7.4 PBS 缓冲溶液进行充分透析。

3. 抗体用量:浓度应在 0.5 - 5 mg/ml 之间。具体用量参照下表:   

   1.相应抗体或其它蛋白分子标记量及体积关系

规格

HRP 

抗体量

反应最佳体积

200U

200 μg

200  800 μg

200 μl

500U

500 μg

500 - 2000 μg

500 μl

1000U

1000 μg

1000 - 4000 μg

1000 μl

5000U

5000 μg

 5000 - 20000 μg

5000 μl

注:抗体用量可以根据实验需要进行调整。在相应的 HRP 用量范围内,抗体量越少,HRP 标记效率越充分。

4. HRP 即溶即用,不建议 HRP 溶解后分装使用。

5. 本产品也可以用于带有氨基基团的蛋白质连接,其具体用量根据试验需要进行适当调整。