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Product Information
在流式细胞术的表面染色中,白细胞亚群(尤其是单核细胞和巨噬细胞)均存在与抗体或荧光基团发生非特异性结合的现象。这种背景可由FcγR和/或花青素染料引起。
FcγR是免疫球蛋白超家族的I型跨膜蛋白共有FcγRI(CD64),FcγRII(CD32)和FcγRIII(CD16)三种分型,在B细胞、单核细胞、巨噬细胞、NK细胞和粒细胞等细胞上表达。在免疫学实验中,如细胞分选、免疫荧光、免疫组化和流式细胞术等,染色一抗和二抗的Fc区域与细胞表面的FcγR非特异性结合,造成高背景,对实验结果带来较大的误差。
花青素染料(如Cy系列)及其相关串联染料(如PE-Cy5.5、PE-Cy5、PerCP-Cy5.5、CF594、PE-CF594、PE-Cy7、APC-Cy7和APC-H7)也可与白细胞亚群之间的非特异性结合,导致高背景信号,影响结果分析;这一现象或由花青素染料自生疏水性和电荷的原因引起。
MonoZero™ Human/Mouse Leukocyte Blocking Reagent可同时阻断抗体与人/小鼠 Fc 受体表达细胞(如 B 细胞、单核细胞和巨噬细胞)的结合和避免花青素染料(如Cy系列)及其相关串联染料与白细胞亚群之间的非特异性结合,以减少背景染色,获得准确的结果。
本产品是猪IgG1恒定区为骨架的嵌合抗体, 含有人IgG Fc片段溶解于含0.09%叠氮化钠的PBS缓冲液中,在染色体系中不推荐使用抗人IgG Fc抗体。
产品成分
缓冲液:PBS,pH 7.2,0.1% Proclin,Human IgG
保存条件
本产品应储存在2-8℃环境中,避免冷冻。有效期1年。使用前请确保试剂完全解冻并混合均匀。为保证最佳使用效果,建议在有效期内使用。请根据实验需求合理规划使用量,避免长时间暴露于室温环境。产品开封后应密封保存,防止污染。
使用方法
本产品适用于流式细胞术实验。推荐2 uL/ 100 uL细胞悬液,具体用量可根据实验条件和细胞类型进行调整。使用时,先将细胞悬液与MonoZero™ Human/Mouse Leukocyte Blocking Reagent按比例混合,孵育10 min后加入抗体孵育。
实验方案:
1、将细胞制成细胞悬液,浓度约为1×10^7 cells/mL。
2、取适量细胞,按2 uL/100 uL细胞悬液加入MonoZero™ Human/Mouse Leukocyte Blocking Reagent,轻轻混匀后于室温孵育10 min后加入适量流式抗体,继续孵育30分钟。孵育结束后,用流式染色缓冲液洗涤两次,离心弃上清,重悬细胞后进行流式细胞术检测。
注:A.本品为人/小鼠Fc受体通用阻断试剂盒,可用于人/小鼠来源的细胞上使用。
B.本品孵育十分钟后无需洗涤,直接孵育目的抗体即可。


