超敏ECL化学发光检测试剂盒

Product Information

Proteintech 研发的超敏ECL 化学发光检测试剂盒（Ultrasensitive ECL Detection Kit，PK10003）是免疫印迹实验中与辣根过氧化物酶（HRP）配套使用的底物检测试剂盒。本产品能够在HRP 的催化下发生化学反应而发光，可用于检测固定在膜上的蛋白质等生物大分子，由于使用了两种新的增强剂混合协同增强发光，其高灵敏度能够检测低pg 级别的抗原，发光信号更强烈持久，使用照相技术（X-光胶片曝光）或者其他成像方法（如荧光或化学发光成像仪）进行检测。

产品特色

高信噪比——与竞品相同灵敏度ECL相比，信号更强，背景更低。

信号持续时间长——信号持续时间长达12小时以上。

兼容性强——适用于PVDF膜和NC膜，同时可用于照相技术（X-光胶片曝光）或者其他成像方法（如荧光或化学发光成像仪）。

稳定性好—— 4-8℃稳定保存一年以上，37℃加速3个月灵敏度无变化。

多种包装规格——100 mL / 200 mL / 500 mL

通用型B液——所有不同灵敏度ECL通用相同的B液。

产品成分

保存条件

4 ℃密封避光保存，一年有效。

使用方法

1. Western 二抗孵育后，印迹膜经过数次充分洗涤后，用平头镊将膜取出，用吸水纸略吸去过多的液体（切勿接触膜的蛋白质），然后置于一洁净器皿内或是保鲜膜上。

2. 根据印迹膜大小，将A 液与B 液等体积混合，配制为发光检测底物工作液（使用量约为每10 cm² 膜1 mL 或者根据个人实验习惯使用）。滴加发光底物工作液到印迹膜上，确保工作液均匀覆盖在膜上，放置1-2 分钟。

3. 取膜，弃发光底物工作液，用吸水纸略吸去过多的液体，将膜放置于两片洁净保鲜膜中间，此过程应小心完成，避免膜与膜之间产生气泡。随后进行压片检测或是荧光成像仪检测。

4. 压片检测：将膜固定于片夹内，暗室内压片1 分钟，立即显影定影，根据结果再调整压片时间。或直接分别压片30秒、1、3、5 分钟，然后一起显影定影观察结果。

5. 荧光成像仪检测：将膜放置到荧光成像仪内，参照仪器说明书进行检测。

问题解答

注意

1. 为获得最佳实验结果，请务必优化实验条件，包括检测样品的用量、一抗和二抗稀释度、杂交膜及封闭试剂的选择。

2. 务必使用推荐的抗体稀释浓度以获得阳性结果，最佳抗原和抗体用量须通过预实验来确定。

3. 由于奶粉中含有内源性生物素，在使用亲和素/生物素系统时，封闭液中应避免使用奶粉。

4. 由于叠氮钠是HRP 抑制剂，在缓冲液中应避免使用叠氮钠作为防腐剂。

5. 在与膜发生接触过程中，请佩戴手套且使用干净镊子等洁净器材，避免蛋白污染及高背景。

6. A 液和B 液在吸取过程中必须要更换枪头，A 液和B 液相互污染后会导致A 液或B 液逐渐失效，影响后续的使用效果。A 液与B 液混合后须尽快使用，放置过久会影响灵敏度。

7. 各溶液使用后，请盖紧瓶盖避光保存，以防失效。特别是B液，含有氧化剂，容易被还原而失效。

8. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

实验结果