PEI 转染试剂

Cat No : PR40001



产品介绍

PEI(Polyethyleneimine)是一种水溶性高分子聚合物,能将 DNA、RNA、寡聚核酸等缩合成带正电的微粒,这些微粒可以黏合到带有负电荷的细胞表面残基,通过胞吞作用进入细胞,进入细胞之后通过渗透压的改变,PEI与 DNA聚合物被释放出来,DNA就可以自由融合到细胞核中。

Proteintech研发的 PEI转染试剂具有毒性小,转染效率高,操作简便等优点。可根据需要选择 6孔板,12孔板,24孔板等不同体系进行转染实验。

 组分1mL
 转染试剂液体


保存条件

4 ℃保存,一年有效

使用方法

1. 实验前一天细胞铺板,以 6孔板为例,每个孔加入 1.5mL培养基(建议使用无抗生素的培养基),根据细胞生长速度,每个孔约 0.2-1x106个细胞,保证在转染之前,细胞达到 70%-80%的密度。

2. 准备两支 1.5mL 洁净无菌 EP 管,分别加入 250μL 无血清培养基,再将 4μg DNA 和 5μL PEI 转染试剂分别加入 EP管中,37℃孵育 5分钟。然后将 PEI缓慢加入到 DNA中,轻轻混匀,37℃孵育 15分钟,无需更换培养基。最后将500 ul的 PEI和 DNA复合物均匀加入到 6孔板中,轻轻晃动 6孔板,使复合物尽量分布均匀。

3. 24小时后即可收集细胞,或者加入 G418进行稳定细胞株的筛选。

4. 根据不同的实验需求,可按照下表选择转染体系:



6孔板

12孔板

24孔板

铺板的细胞数目

0.2-1×106

0.1-0.5×106

0.5-2.5×105

培养基体积

1.5mL

0.75mL

0.4mL

DNA

4μg

2μg

1μg

PEI

5μL

2μL

1μL

培养基总体积

2mL 

1mL

0.5mL


注:为了获得更好的转染效率,以 6孔板的一个孔为例,DNA的用量可以在 2-4μg进行调整,PEI的用量可以在 2-5μL进行调整。

注意

1. 为了提高转染效率,建议采用高纯度质粒提取试剂盒,获得高纯度、除内毒素的 DNA或 RNA。

2. 转染之前必须保证细胞生长状态良好,转染实验时建议使用无抗生素的培养基进行细胞培养。

3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

Publications

ApplicationTitle

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