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ChemBright抗体标记试剂盒

ChemBright系列是Proteintech基于马来酰亚胺反应研发的一种抗体标记试剂盒，可在1-2小时内将标记物与抗体共价偶联。

  • 标记快速：仅需1-2h即可完成，无需后续纯化
  • 产物稳定：标记后的抗体可在4℃保存长达12个月
  • 温和标记：从源头避免抗体损伤，偶联得率和活性显著提升
  • 操作极简：仅需三次移液和孵育，告别复杂处理步骤

ChemBright系列产品基于马来酰亚胺反应而开发，在传统技术上进行了创新升级。

传统马来酰亚胺偶联技术通过还原断裂抗体链间二硫键暴露巯基，以实现后续偶联反应；但体系中过量还原剂易引发抗体过度还原与结构断裂，产生无生物活性的抗体片段，影响标记产物质量。

NHS酯偶联法通过抗体表面的伯氨基‌（–NH₂）与NHS酯反应，形成稳定的酰胺键。

ChemBright技术无需还原抗体二硫键，而是通过特异性修饰将抗体赖氨酸残基上的伯氨基转化为活性巯基（4-6个巯基），从根源上杜绝过度还原导致的抗体失活。该方法无需去除多余还原剂，简化操作流程，同时显著提高偶联抗体得率与活性。


图1 ：ChemBright 可避免传统马来酰亚胺偶联抗体时过度还原的风险
图2 ：ChemBright标记抗体的效率远高于NHS酯标记抗体（纯化后）分别采用NHS 酯偶联法与ChemBright技术，将抗人CD3抗体（货号：65151-1-Ig，克隆号：UCHT1）标记 CoraLite® Plus 488 荧光染料。使用不同用量的标记抗体对1 ✖ 10⁶人外周血单个核细胞（PBMC）进行染色。
ChemBright抗体标记试剂盒工作流程。

1. 取100 ug一抗加入A管中，吹打混匀。室温孵育15分钟。

2. 将A管内全部液体转移至B管中，吹打混匀。室温下避光旋转孵育30分钟至1小时后，短暂离心。

3. 向B管中加入20 uL终止反应试剂，再将B管内全部液体转移至储存管C中，吹打混匀， 孵育10分钟。

MCF-7 细胞免疫荧光实验： 经多聚甲醛（PFA）固定的细胞分别使用以下抗体染色：抗 ZO-1 抗体（货号：21773-1-AP），经 Chembright 标记试剂盒（货号：PK30030）标记，显绿色荧光；抗 Tubulin-Alpha抗体（货号：66031-1-Ig），经 Chembright 标记试剂盒（货号：PK30031）标记，显品红色荧光；细胞核使用 DAPI 染色，显蓝色荧光。
取1×10⁶个人外周血单个核细胞（PBMC），采用以下两种抗体进行细胞表面染色： 0.125 ug 经ChemBright CoraLite® Plus 488抗体标记试剂盒（货号：PK30030）标记的抗人CD3抗体（货号：65151-1-Ig，克隆号：UCHT1），以及0.125 ug 经ChemBright CoraLite® Plus 647抗体标记试剂盒（货号：PK30031）标记的抗人CD4抗体（货号：65147-1-Ig，克隆号：SK3）。细胞未进行固定。染色前使用Fc受体阻断剂处理细胞。圈选淋巴细胞。
用HepG2细胞和HT29细胞裂解液进行SDS-PAGE实验，随后用Western blot检测。一抗使用经ChemBright CoraLite® Plus 488抗体标记试剂盒（货号：PK30030）偶联的TOM20多克隆抗体（货号：11802-1-AP），稀释比例为1:1000，室温孵育1.5小时。
产品名称 货号 偶联物 应用
ChemBright CoraLite® Plus 405 Antibody Conjugation Kit PK30035 CoraLite® Plus 405 FC, IF/ICC, WB
ChemBright CoraLite® Plus 488 Antibody Conjugation Kit PK30030 CoraLite® Plus 488 FC, IF/ICC, WB
ChemBright CoraLite® Plus 647 Antibody Conjugation Kit PK30031 CoraLite® Plus 647 FC, IF/ICC, WB
ChemBright CoraLite® Plus 750 Antibody Conjugation Kit PK30034 CoraLite® Plus 750 FC, IF/ICC, WB
ChemBright FITC Plus Antibody Conjugation Kit PK30032 FITC Plus FC, IF/ICC, WB
ChemBright Biotin Antibody Conjugation Kit PK30033 Biotin FC, IF/ICC, WB

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