短臂生物素标记试剂盒
Cat No : PK20004
Validation Data Gallery
产品介绍
Proteintech的生物素标记试剂盒提供了生物素标记所需全套试剂,试剂盒用于标记含有氨基(NH2-)抗体。试剂盒所含生物素已经被活化,可直接使用,可以用于标记0.1-5 mg抗体。试剂盒还包括缓冲液,超滤管,保护液,抗体无需透析,操作简便,完整流程仅需90min可完成。
基本信息:
结构式:
分子量:341.4
产品特点:
全面:本试剂盒提供了生物素标记所需全部组分。
快速:整个过程仅需90 min。
简便:抗体无需透析。
灵活:可标记抗体范围广 0.1-5 mg。
稳定:产品已进行37度加速4天的稳定性测验,检测结果合格。
应用推荐:此试剂盒用于抗体的生物素标记,标记后的抗体经检测适用于绝大多数的ELISA的应用和部分IHC的应用。
组分 |
规格 |
规格 |
2次标记 |
5次标记 |
|
最大可标记抗体量 |
2 mg |
5 mg |
NHS-bio |
0.1 mg/支×2 |
0.1 mg/支×5 |
Labeling buffer |
15 mL ×1 |
30 mL ×1 |
DMF |
200 uL×1支 |
200 uL×1支 |
超滤管 |
0.5 mL×4 |
0.5 mL×10 |
抗体保护液 |
1 mL |
2 mL |
说明:未开封试剂盒2-8℃保存1年,溶解后的生物素 能在2-8 ℃ 保存1周
需自备相关实验物品:
1. 移液器及一次性吸头;
2. 37℃ 恒温培养箱;
3. 离心机
标记原理:
操作步骤:
使用方法
实验前准备
1. 将试剂盒在室温平衡15-30 分钟;
2. 计算溶解后的生物素用量;
实验操作流程:
1.每0.1 mg的生物素冻干粉使用10 uL DMF溶解,溶解后生物素浓度为 10 mg/mL。
2.取待标记抗体加入超滤管中,并加入适量体积的Labeling buffer,至总体积为0.5 mL,12000×g离心10分钟,当有甘油时,重复此步骤2-3次,最后一次用Labeling buffer重悬抗体,使待标记抗体的终浓度为2 mg/mL。(注意:加入总体积不要超过超滤管最大体积0.5 mL)。
3. 加入适量溶解后的生物素(推荐抗体:生物素的质量比为10:1),比如0.5 mL 2 mg/mL抗体(MW 150000), 加入浓度为10 mg/mL的生物素 10 uL,并轻轻吹打混匀,放入37℃恒温箱中避光孵育30分钟。
4. 孵育结束后12000×g离心10分钟。
5. 洗涤:加入适量Labeling buffer至上述超滤管中,使终体积为0.5 mL,轻轻吹打混匀,12000×g离心10分钟,并重复此操作一次。
6. 回收:离心结束后,取0.2mL Labeling buffer加入上述超滤管中,轻轻吹打,将滤芯倒转放置于另一个干净的离心管中,6000×g离心10分钟。
7. 定容:收集离心管中的溶液,即为生物素标记完成的抗体。可以依据需要,加入 Labeling buffer,调整浓度,再加入同体积的保护剂,-20度保存。
注意
1. 本试剂盒也可标记其他含有氨基的抗原、HRP、多肽、具体标记比例根据待标记物中氨基的数量而定。
若标记蛋白,建议调整蛋白浓度至2 mg/mL,此时按蛋白:生物素的分子比1:20;
应加入生物素量的计算方法:
2. 对于 10 mmoL 的生物素溶液,应加入反应中该生物素体积的计算方法:
3. DMF需要密封干燥保存。
4. 本试剂盒提供的超滤管为10 KD,标记抗原或多肽分子量20 KD及以上。
5. 标记前请根据待标记的抗体量计算好生物素的用量。
其他
实验前请仔细阅读本说明书
本试剂盒仅用于科研,不用于临床诊断