长臂生物素标记试剂盒

Cat No : PK20005



产品介绍

Proteintech的生物素标记试剂盒提供了生物素标记所需全套试剂,试剂盒用于标记含有氨基(NH2-)抗体。试剂盒所含生物素已经被活化,可直接使用,可以用于标记0.1-5 mg抗体。试剂盒还包括缓冲液,超滤管,保护液,抗体无需透析,操作简便,完整流程仅需90min可完成。


基本信息:

结构式:

PK20005.jpg 

分子量:567.7


产品特点:

  全面:本试剂盒提供了生物素标记所需全部组分。

  快速:整个过程仅需90 min。

  简便:抗体无需透析。

  灵活:可标记抗体范围广 0.1-5 mg。

  稳定:产品已进行37度加速4天的稳定性测验,检测结果合格。

 

应用推荐:此试剂盒用于抗体或蛋白的生物素标记,标记后的抗体经检测适用于绝大多数的ELISA的应用和部分IHC的应用,优先推长臂生物素试剂盒标记抗体,因为在ELISA应用中比较发现,长臂生物素的信噪比更高。


组分                

规格                

规格                


2次标记                

5次标记                

最大可标记抗体量                

2 mg                

5 mg                

NHS-LC-LC-bio                

0.1 mg/支×2                

0.1 mg/支×5                

Labeling buffer                

15 mL ×1                

30 mL ×1                

DMF                

200 uL×1支                

200 uL×1支                

超滤管                

0.5 mL×4                

0.5 mL×10                

抗体保护液                

1 mL                

2 mL                

说明:未开封试剂盒2-8℃保存1年,溶解后的生物素 能在2-8 ℃ 保存1周


需自备相关实验物品:

1. 移液器及一次性吸头;

2. 37℃ 恒温培养箱;

3. 离心机


标记原理:



操作步骤:

生物素标记步骤加Y .jpg

使用方法

实验前准备

1. 将试剂盒在室温平衡30 分钟;

2. 计算溶解后的生物素用量;

 

实验操作流程:

1.每0.1 mg的生物素冻干粉使用10 μL DMF溶解,溶解后生物素浓度为 10 mg/mL。

2.取待标记抗体加入超滤管中,并加入适量体积的Labeling buffer,至总体积为0.5 mL,12000×g离心10分钟。(注:a. 超滤管最大体积为0.5 mL;b. 待标记抗体浓度较低时,可先超滤离心一次,再加入适量的Labeling buffer至超滤管中,使待标记抗体的终浓度为2 mg/mL。)

3. 加入适量溶解后的生物素(推荐抗体:生物素的质量比为10:1),比如0.5 mL 2 mg/mL抗体(MW 150000), 加入浓度为10 mg/mL的生物素 10 μL,并轻轻吹打混匀,放入37℃恒温箱中避光孵育30分钟。

4. 孵育结束后12000×g离心10分钟。

5. 洗涤:加入适量Labeling buffer至上述超滤管中,使终体积为0.5 mL,轻轻吹打混匀,12000×g离心10分钟,并重复此操作一次。

6. 回收:离心结束后,取0.2mL Labeling buffer加入上述超滤管中,轻轻吹打,将滤芯倒转放置于另一个干净的离心管中,6000×g离心10分钟。

7. 定容:收集离心管中的溶液,即为生物素标记完成的抗体。可以依据需要,加入 Labeling buffer,调整浓度,再加入同体积的保护剂,-20度保存。

注意

1. 本试剂盒也可标记其他含有氨基的抗原、HRP、多肽、具体标记比例根据待标记物中氨基的数量而定。

若标记蛋白,建议调整蛋白浓度至2 mg/mL,此时按蛋白:生物素的分子比1:20; 

 应加入生物素量的计算方法:

pk20005-3.jpg

2. 对于 10 mmoL的生物素溶液,应加入反应中该生物素体积的计算方法:

pk20005-4.jpg

3. DMF需要密封干燥保存。

4. 本试剂盒提供的超滤管为10 KD,标记抗原或多肽分子量20 KD及以上

5. 标记前请根据待标记的抗体量计算好生物素的用量。

其他

实验前请仔细阅读本说明书

本试剂盒仅用于科研,不用于临床诊断