即用型HRP标记羊抗兔二抗

Cat No : PR30011



产品介绍

此二抗是利用最新的聚合技术将多个过氧化物酶(HRP)分子及抗兔免疫球蛋白(IgG)偶联到多聚物上,形成的聚合物(二抗)具有放大信号增加敏感度、减少非特异性背景特点。与兔一抗进行搭配使用,结合后再与DAB反应,可得棕色显色。

适用于常规福尔马林液固定石蜡包埋切片

保存条件

本品应在2-8℃保存,并在有效期(一年)内使用,切勿冻存。

使用方法

1)  脱蜡水化:二甲苯中浸泡切片2次,每次20分钟。然后依次在100%,95%,80%和60%乙醇,每级放置5分钟。再用蒸馏水浸洗3次,每次1分钟。

2)  抗原修复:加入柠檬酸修复液(货号:PR30001)或Tris-EDTA修复液(货号:PR30002后,将切片放置微波炉,中火修复10分钟。结束后在修复液中自然冷却40分钟。然后用去离子水冲洗3次,每次1分钟。

3)  灭活:加入3%H2O2(去离子水配制),室温孵育10 分钟以灭活内源性过氧化物酶。TBS冲洗3次,每次1分钟。

4)  封闭:用3%BSA(TBS配制)室温孵育 1小时。勿洗,用吸水纸吸去多余封闭液。

5)  一抗反应:滴加适量兔一抗(抗体稀释液稀释),室温孵育1~2 小时或者4度过夜孵育。TBS冲洗3次,每次1分钟。

6)  二抗反应:滴加适量即用型HRP标记抗兔二抗,室温孵育30 分钟,TBS冲洗3次,每次1分钟。

7)  DAB显色:滴加适量DAB工作液,室温孵育5-10分钟, 或者镜下控制反应时间。去离子水冲洗3次,每次1分钟。

8)信号增强:滴加适量1%CuSO4 (去离子水配制),室温孵育5分钟,去离子水冲洗3次,每次1分钟。

   此步可根据个人实验情况选做。

9)  复染:苏木素复染2-3分钟,然后TBS冲洗切片3次,每次1分钟。再在去离子水中浸泡切片5 分钟。

10) 脱水:各级酒精60%,80%,95%,100%脱水,每级5分钟。取出后置于二甲苯2次,每次5分钟。

11)封片:用封片胶封片,显微镜观察。

注意

本二抗仅用于体外研究


Publications

ApplicationTitle

Exp Neurol

Indole-3-propionic acid alleviates ischemic brain injury in a mouse middle cerebral artery occlusion model.

Authors - Yu Xie
WB

Bioengineered

Long non-coding RNA FAM83A antisense RNA 1 (lncRNA FAM83A-AS1) targets microRNA-141-3p to regulate lung adenocarcinoma cell proliferation, migration, invasion, and epithelial-mesenchymal transition progression.

Authors - Hongyu Huang