50×HAT储存液

Cat No : PR40014



产品介绍

本产品为0.01M PBS溶解的HAT(次黄嘌呤、氨基蝶呤和胸腺嘧啶核苷)的储存液,详细成分为

0.005 M 次黄嘌呤(Hypoxanthine,CAS号:68-94-0)

0.00002 M氨基蝶呤(Aminopterin,CAS号:54-62-6) 

00.0008 M 胸腺嘧啶核苷(Thymidine,CAS号:50-89-5)

154 mM NaCl

1.058 mM KH2PO4 

5.584 mM Na2HPO4 

本品为无菌溶液(0.22μm无菌滤膜过滤),室温下pH稳定在7.2~7.4,适用于单克隆抗体制备过程中的杂交瘤细胞的选择性培养。


保存条件

-20℃避光保存,保质期一年,可反复冻融多次。


使用方法

1. 本产品为50×储存液,室温融化后按体积比1:50加入到完全培养基中,摇匀即为HAT工作液(HAT筛选系统中各组份比例无需苛刻,因此取用操作时允许20%左右体积误差)。

2. 配好的HAT工作液即可用于杂交瘤的初步筛选培养。注意:除培养基外,杂交瘤的培养需要单独制备饲养层细胞或添加细胞因子。

注意

1. 本产品有一定毒性,仅供用于杂交瘤细胞的筛选及培养,不可用于培养活体动、植物或组织,非诊断或治疗药物。

2. 本产品适用于HGPRT筛选系统的杂交瘤细胞的培养,尚未用于TK或其它选择系统的细胞培养。本品不能用于直接培养HGPRT缺陷细胞(如NS1, SP2/0, FO等)。

3. 本产品为无菌溶液,pH中性,取用需在无菌条件下进行。

4. 初始的杂交瘤细胞对营养需求较高,培养3天后用本产品半换液,再过两天后用本产品全换液,再间隔一天或两天后即可进行克隆的初步筛选检测。使用本产品筛选杂交瘤细胞的过程中,有大量细胞死亡属于正常现象;可通过半量换液减少细胞碎片。

5. 本产品开盖配制成工作液后,工作液请放4℃保存,并最好在1个月内用完;如果1个月内不能用完,建议开盖时无菌分装成多管,按量取需配制工作液,多余产品在-20℃保存。

6. 本产品在室温融化时,若有少量沉淀或析出,摇匀后静置半小时即可完全溶解。

7. 开盖时请按箭头方向开启,小心操作防止铝盖划手。