His 标签洗脱液(无SKL)

Cat No : PR40004



产品介绍

HIS Elution buffer的洗脱原理是通过通过高浓度的咪唑洗脱目的蛋白,洗脱液中的咪唑通过和金属离子结合从而高效地替换掉HIS标签融合蛋白。HIS Elution buffer中加入SKL能够促进蛋白的溶解度,加入甘油不仅能降低目标蛋白的极性,同时能保护目标蛋白的活性。对于目标蛋白失去活性的情况可以使用HIS Elution buffer(no SKL)。

 组分10mL
 Elution Buffer液体


保存条件

4℃下保存半年。

使用方法

HIS beads纯化步骤

1. 将细胞裂解液高速离心,上清加入准备好的beads中,在旋转仪上4℃条件下旋转孵育至少1h。

2. 瞬时离心后,保留一些上清,用SDS-PAGE电泳检测介质结合能力,留beads。

3. 每0.5 mLbeads加1 mL HIS洗涤液洗涤,瞬时离心后留beads;重复3次。

4. 每0.5 mLbeads加入0.6 mLHIS Elution buffer,旋转仪于4℃条件下轻轻转动孵育1h;

5. 瞬时离心沉淀beads,保留上清液(相当于洗脱液),制样,用SDS-PAGE电泳检测洗脱得到的蛋白。

注意

1. 蛋白比较容易降解,务必保证每步在冰上进行,收集目的蛋白以后,请于 4℃ 或-20℃ 保存。

2. 为了安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。