无血清无DMSO细胞冻存液

使用方法

冻存细胞操作步骤：

1. 常规方法收集对数期的贴壁细胞或悬浮细胞于试管中。

2. 根据培养密度及冻存管的大小、管数确定细胞量。

3. 将所需数目的细胞悬液置于离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去离心管中上清液。

4. 加入适量的细胞冻存液于离心管中，使细胞浓度约为5×10⁵-1×10⁷ /ml。轻柔地混匀细胞，制成细胞悬液。 

5. 将离心管中的细胞悬液分装于已标记的冻存管中，建议每管1 mL 或1.5 mL。

6. 将分装好的细胞冻存管放入程序冻存盒中逐步降温或者直接放入-80℃超低温冰箱中降温。

7. 如果想液氮中长期保存，需先放入-80℃冰箱至少一天时间，方可移至液氮罐中保存。

复苏细胞操作步骤：

1. 从冰箱中取出冻存的细胞，立即放入37℃水浴锅中快速解冻。

2. 待冻存管中细胞悬液完全融化后，立即加入 1 mL 细胞培养基于冻存管中重悬细胞， 将其中的细胞悬液移至含有约 5 mL 该细胞培养基的离心管中，1000 rmp，5 min离心收集冻存细胞沉淀，移去上清液（操作时小心，切勿将细胞沉淀移去）。 

3. 加入适量的新鲜细胞培养基，使用移液管缓缓加入到细胞沉淀，轻柔地混匀，将细胞混合液移至事先准备好的培养容器中。

4. 镜检细胞后，可根据各自研究的需要和方法进行细胞常规培养。