即用型HRP标记羊抗小鼠二抗
Cat No : PR30012
Validation Data Gallery
产品介绍
此二抗是利用最新的聚合技术将多个过氧化物酶(HRP)分子及抗小鼠免疫球蛋白(IgG)偶联到多聚物上,形成的聚合物(二抗)具有放大信号增加敏感度、减少非特异性背景特点。与小鼠一抗进行搭配使用,结合后再与DAB反应,可得棕色显色。
适用于常规福尔马林液固定石蜡包埋切片
保存条件
本品应在2-8℃保存,并在有效期(一年)内使用,切勿冻存。
使用方法
1) 脱蜡水化:二甲苯中浸泡切片2次,每次20分钟。然后依次在100%,95%,80%和60%乙醇,每级放置5分钟。再用蒸馏水浸洗3次,每次1分钟。
2) 抗原修复:加入柠檬酸修复液(货号:PR30001)或Tris-EDTA修复液(货号:PR30002)后,将切片放置微波炉,中火修复10分钟。结束后在修复液中自然冷却40分钟。然后用去离子水冲洗3次,每次1分钟。
3) 灭活:加入3%H2O2(去离子水配制),室温孵育10 分钟以灭活内源性过氧化物酶。TBS冲洗3次,每次1分钟。
4) 封闭:用3%BSA(TBS配制)室温孵育 1小时。勿洗,用吸水纸吸去多余封闭液。
5) 一抗反应:滴加适量小鼠一抗(抗体稀释液稀释),室温孵育1~2 小时或者4度过夜孵育。TBS冲洗3次,每次1分钟。
6) 二抗反应:滴加适量即用型HRP标记抗小鼠二抗,室温孵育30 分钟,TBS冲洗3次,每次1分钟。
7) DAB显色:滴加适量DAB工作液,室温孵育5-10分钟, 或者镜下控制反应时间。去离子水冲洗3次,每次1分钟。
8)信号增强:滴加适量1%CuSO4 (去离子水配制),室温孵育5分钟,去离子水冲洗3次,每次1分钟。
此步可根据个人实验情况选做。
9) 复染:苏木素复染2-3分钟,然后TBS冲洗切片3次,每次1分钟。再在去离子水中浸泡切片5 分钟。
10) 脱水:各级酒精60%,80%,95%,100%脱水,每级5分钟。取出后置于二甲苯2次,每次5分钟。
11)封片:用封片胶封片,显微镜观察。
注意
本二抗仅用于体外研究
Publications
Application | Title |
---|---|
Food Chem Toxicol DBP induced autophagy and necrotic apoptosis in HepG2 cells via the mitochondrial damage pathway | |
Oncol Rep Aprepitant inhibits the progression of esophageal squamous cancer by blocking the truncated neurokinin‑1 receptor | |
Bioengineered Long non-coding RNA FAM83A antisense RNA 1 (lncRNA FAM83A-AS1) targets microRNA-141-3p to regulate lung adenocarcinoma cell proliferation, migration, invasion, and epithelial-mesenchymal transition progression. | |
Molecules Phenolic Acids from Fructus Chebulae Immaturus Alleviate Intestinal Ischemia-Reperfusion Injury in Mice through the PPARα/NF-κB Pathway | |
Nutrients Promoting Effect of L-Fucose on the Regeneration of Intestinal Stem Cells through AHR/IL-22 Pathway of Intestinal Lamina Propria Monocytes | |
Animals (Basel) Polysaccharide of Atractylodes macrocephala Koidz Alleviates Cyclophosphamide-Induced Thymus Ferroptosis in Gosling |